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羊膜作为生物材料应用于基础及临床已经有多年的历史,早在20世纪初期就有用含羊膜的胎膜供体移植于烧伤和溃疡创面的报道,随后在颅脑外科、腹腔外科、妇产科及眼科均有众多的应用报道。羊膜特有的结构和生物学活性,使其成为较理想的生物材料。随着生物工程技术、组织工程技术的发展,羊膜的应用更加广泛,研究更加深入。

1 羊膜应用

1.1 完整羊膜组织的应用

1.1.1 重建眼表:结膜损伤是常见的眼表疾病。采用口唇黏膜作为结膜替代物,取材繁琐,术后外观欠佳,给患者增加了一定的痛苦。用羊膜替代结膜重建眼表,手术程序相对简单, 残存的结膜细胞能很快在羊膜上爬行生长,术后外观及功能均较为满意。羊膜组织因其独特的结构在重建健康眼表、防止角膜结膜化、血管化、感染及睑球粘连等方面具有独特的作用,目前已广泛应用于眼科临床。

1.1.2 睑球粘连:羊膜移植是解决睑球粘连的有效方法。睑球粘连见于各种原因引起的大面积结膜损害,如化学烧伤、热灼伤、机械性损伤、重型渗出性多形性红斑综合征(Stevens-Johnson syndrome)、复发性胬肉等。将羊膜移植用于睑球粘连的结膜穹隆重建,改善睑球粘连,重建穹隆。

1.1.3 角膜溃疡:对于顽固性、药物治疗无效的上皮细胞缺失的患者,羊膜移植提供了一种可选择的新方法。无论是单层羊膜覆盖浅的溃疡还是多层羊膜移植治疗较深的溃疡,都取得了满意的临床疗效,大多数患者获得了有效的术后视力,相比较于角膜移植其优势明显。同时,手术后羊膜凭借较好的透明性可以使患者获得较好的远视力。

1.1.4 视网膜移植:使用分散酶处理过的羊膜为基底膜培养人视网膜色素上皮(RPE)细胞,培养的RPE 细胞的RPE65、酪氨酸相关蛋白-2 等的基因表达上调;血管内皮生长因子、色素上皮衍生因子明显增高。表明羊膜作为培养RPE 细胞的基质可能有利于RPE 细胞的分化及上皮表型表达。这些研究结果使羊膜在眼科的应用有了新的发展方向,为视网膜移植提供了新的研究方向与发展空间。

1.1.5 硬脊膜损伤:用中国白兔行L5 水平椎板切除术,分别在硬膜外覆盖羊膜、几丁糖膜,空白对照组不做任何覆盖。空白对照组暴露的硬膜发生广泛粘连,硬膜外腔基本消失;羊膜组和几丁糖膜组硬膜外瘢痕稀少,硬膜表面光滑,硬膜外形成潜在腔隙,维持了硬膜外的有效空间。不同时间段三组间粘连度评价结果差异显著,以羊膜组最低,几丁糖膜组次之,空白组最高。在硬膜和骶棘肌间放置合适的材料可预防硬膜外粘连,羊膜能预防硬膜外瘢痕向椎管内延伸。

1.1.6 糖尿病难愈性皮肤溃疡:羊膜组织在促进创面修复中有积极的作用。糖尿病难愈性创面应用人胎羊膜覆盖治疗,对照组采用常规治疗,分别于第3、7、14 天观察创面上皮匍行后的面积及肉芽成熟程度。在治疗第7、14天时,羊膜治疗组上皮匍行速度及肉芽组织生长均明显优于对照组。

1.1.7 烧伤:羊膜是生物敷料中较重要的一类,外层为疏松结缔组织,内层为上皮细胞组织,无血管、无神经、无淋巴的半透明薄膜,含胶原、糖蛋白、蛋白多糖等多种成分,并表达多种生长因子mRNA 及相关蛋白, 有利于细胞的生长繁殖,是细胞的良好载体。羊膜可以促进烧伤创面愈合,降低创面感染率。采用同体对照,比较牛羊膜和作为对照的凡士林油纱敷料在烧伤创面的临床应用效果,羊膜组材料换药时患者疼痛轻微,对照组较明显。羊膜组创面愈合时间在各类创面中均低于对照组, 差异有显著性意义,并且创面感染率在深Ⅱ度和残余创面也明显低于对照组。

1.1.8 骨科疾病应用:人羊膜还被应用于骨科疾病,如人胚半月板纤维软骨细胞扩增后与羊膜进行复合培养,纤维软骨细胞于羊膜上牢固黏附,3d 开始增殖,2 周时已有大量细胞生长于羊膜上。骨折后骨膜缺损病例部位用羊膜覆盖,缺损骨膜得到很好地修复。

1.1.9 肌腱损伤修复:临床观察结果显示,肌腱损伤部位缝合后包裹羊膜,可明显改善局部黏连,促进肌腱胶原纤维合成,缩短修复时间,肌腱承载力明显优于常规缝合治疗。动物实验显示,损伤肌腱愈合时间缩短,组织塑型得以改善,肌腱结构与正常结构无差异。

1.1.10 宫颈与阴道重建术:羊膜能作为一种同种异体移植物用于宫颈再造术效果良好。羊膜作为移植物用于完全性阴道和宫颈不发育的女性的宫颈和阴道成形术中,结果显示在所有病例中上皮形成良好,且宫颈及阴道重建成功。先天性无阴道患者进行羊膜移植阴道成形术的报道。

1.2 羊膜作为支架在组织工程中的应用

1.2.1构建角膜、眼表组织工程修复材料

1.2.2构建皮肤、粘膜组织工程修复材料

1.2.3构建肌腱组织工程修复材料

1.2.4构建骨组织工程修复材料

1.2.5构建周围神经组织工程修复材料

1.3 羊膜细胞作为组织工程种子细胞应用

2 羊膜库

2.1 羊膜建库流程

2.2 羊膜建库的优势与前景



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